聚丙烯酰胺凝胶电泳注意事项_聚丙烯酰胺凝胶电泳

2023-04-03 23:43:01 来源 : 元宇宙网

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1、首先，根据需要对齐长、短玻璃板的一侧，插入约1.5cm宽的间隔物，用1%琼脂糖密封板的侧面和底部。

2、然后根据待分离DNA的大小，配制适当浓度的聚丙烯酰胺凝胶，将装载的玻璃电泳板倾斜45-60度，将配制好的凝胶慢慢倒入两块玻璃板之间的凝胶床中。

3、然后，停止加胶，直到离短玻璃板的上边缘约0.5厘米。同时轻轻插入大小合适的梳子，小心取出梳子，立即用缓冲液冲洗加样孔，用吸水纸吸干加样孔中的缓冲液。

4、然后将凝胶固定在电泳槽上，加入1XTBE缓冲液，将DNA样品与适量的上样缓冲液混合，加入样品孔中。

5、然后，连接电极，将电压设置为1-8V/cm，并进行电泳。电泳结束后，切断电源，丢弃电泳仪，取出凝胶底板，小心取下玻璃板。

6、最后让凝胶吸附在另一块玻璃板上，浸入含0.5 g溴化乙锭的溶液中，取出15-30min，用水冲洗，用紫外仪观察结果，用凝胶成像系统拍照。

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